CTIBiotech和普洛夫迪夫医科大学的团队合作
首席助理教授 Yordan Sbirkov 博士和 Victoria Sarafian 教授（医学博士、博士、DSc）在保加利亚普洛夫迪夫医科大学工作，Yordan Sbirkov博士是该校医学生物学系主任。多年来，他们都与法国里昂CTIBiotech的创始人兼首席科学官 Colin McGuckin 教授进行了合作，包括在2021所出版的《作为疾病建模和化疗筛查平台的结直肠癌3D生物打印工作流程》。
最近一次洲际视频会议上，他们讨论了与CELLINK合作开发他们的原始方案，以及处理充满细菌的人类肠道肿瘤样本的独特挑战。
分享您的结直肠癌研究
Yordan Sbirkov
在我们的论文中，我们测试了与标准单层或2D细胞培养方法相比，结直肠癌的3D生物打印模型是否能更好地代表患者肿瘤。在我们的比较中，我们看到了基因表达、形态、生长模式甚至药物反应的差异。总体而言，我们的3D模型比2D细胞培养对照组更具耐药性。
Colin McGuckin
有时研究人员会在2D癌细胞上筛选化疗药物，效果很好。但当同一种药物用于患者时，它根本不起作用。这也是许多药物在临床试验中失败的原因之一。通过3D生物打印用于临床前药物筛选的肿瘤模型，我们可以更好地确定化疗是否在更相关的体内微环境3D模型中进入癌细胞。然后我们可以测试新的策略，将化疗渗透到需要杀死的肿瘤部位。
Victoria Sarafian
对于我们普洛夫迪夫医科大学的系来说，结直肠癌研究并不是一个新课题。但是，使用3D生物打印技术开发个性化治疗的药物测试平台是一种全新的、令人兴奋的方法。大约三年前，当我们开始这项目时，我们意外地发现只有四篇发表在3D生物打印结直肠癌模型上的论文。当我们着手制定我们的方案时，我们必须应对微生物群污染和许多其他挑战。这或许可以解释为什么关于这个主题的论文不多。
“BIO X的灵活性、速度和再现性有助于成功打印我们的3D结直肠癌模型，” Sbirkov博士说，而这就是他在Sarafian博士的实验室里所用的生物打印机以便开发他的方案。
您是否研制了自己的生物打印规程？
Yordan Sbirkov
是的，一个有趣的部分是找到合适的生物墨水。我们使用CELLINK的RGD bioink原因是它具有相对清晰的短肽功能，这些短肽可以让细胞感觉更自在，相互交流，相互提示。当我们在生物墨水中培养细胞时，我们需要监控它们的进展。我们从不同的时间点提取生物打印模型，并在标准荧光显微镜下进行检查。如果我们看不到细胞，我们就必须停止实验。
Colin McGuckin
我们也不想要一种对癌细胞来说太复杂的生物墨水。有时我们会添加粘附分子、细胞因子或药物，但我们不想要任何会对生物墨水产生化学变化或对癌细胞产生反应的物质。选择像CELLINK这样的公认的生物墨水供应商，可以确保我们可以再次购买相同的生物墨水以复制结果，并且批次之间具有一致性。
Victoria Sarafian
我们还在短时间内使用了CELLINK的 BIO X™ 生物打印3D结直肠癌模型。然后我们使用几种技术来评估生物打印的肿瘤。组织染色用于确定这些细胞是否真的是我们所寻找的癌细胞。在不同的时间点对细胞活性进行评估，以确保我们的方案运行良好，并且我们将拥有下一步所需的细胞数量。这是一个漫长而棘手的过程，但我们对使用 Yordan Sbirkov开发的规程所取得的结果非常满意。
结直肠癌研究面临哪些独特的挑战？
Yordan Sbirkov
细菌感染是原发性结直肠癌细胞生长的最大瓶颈。我们使用的是病人肠道的细胞，那里有数百万细菌，其中一些细菌多年来对抗生素产生耐药性。在实验室里，无论使用何种抗生素，这些细菌都会生长，几天后，细胞就会死亡。
Colin McGuckin
然而，我们的成功率正在提高。在里昂，我们正在寻找扩大细胞并尽快对其进行消毒的方法。另一个正在进行的项目是开发不含动物产品的生长培养基。我们发现，我们使用的动物产品越少，培养基越明确，我们可以生长更多的细胞，增长生长的时间。这是我们第一次能够将打印出来的癌细胞在体外存活8个月以上，它们仍在生长、繁殖。观察这些细胞可以帮助我们更好地了解癌症转移过程中发生的情况。
活结直肠癌细胞的绿色染色显示，在BIO X生物打印后第二十八天，存活率为 85.73%。
哪项CELLINK服务脱颖而出？
Victoria Sarafian
我们对友好、以用户为中心的CELLINK团队感到非常满意，他们安装了BIO X后并同时提供了初步使用培训。
Yordan Sbirkov
在确定购买 BIO X 前，我们研究了三种不同的生物打印机。
一些产品的界面过于复杂，难以使用，而另一些产品的构建能力不如 BIO X。我们发现，BIO X 的易用性、与众多生物墨水的配合性、灵活性以及价格方面都是最好的组合。物超所值！
Colin McGuckin
我已经制作3D组织超过25年了。作为新技术的早期采用者，我对BIO X的功能感到非常满意。市场上的许多其他选择都不是真正的生物打印机。他们的开发人员没有太多考虑活细胞如何进入设计用于挤出塑料的3D打印机。CELLINK使用BIO X 的方法真正关注的是细胞以及如何将它们放入模型中。我还感谢软件团队在开发过程中发布了更有用的更新。老实说，我们不需要什么帮助，因为 BIO X 基本上没有什么问题，但是 CELLINK 的员工还是会常常帮助我们排除故障或为我们的用户打造更好而简便的方法来处理一些在生物墨水上所碰到的问题。我们的用户体验与印象非常好，以至于又购买了多几台 BIO X 生物打印机来升级我们的实验室设施。
